在臨床實(shí)驗(yàn)室，操作感染性標(biāo)本時(shí)或作病原體分離培養(yǎng)、制備菌種時(shí)會(huì)因?yàn)闃悠返恼袷?、搖動(dòng)、傾注、攪拌、移液等操作或液體的灑落，產(chǎn)生肉眼看不見(jiàn)的直徑<5／zrn的氣溶膠或產(chǎn)生直徑為5～100腫的液滴，這些微粒中含有活的致病微生物，可以**作者吸入或污染工作臺(tái)面上的其他樣品。生物**柜是一種設(shè)備，它的作用就是有效地降低實(shí)驗(yàn)室獲得性感染的機(jī)會(huì)，減少人與樣品或樣品與樣品之間交叉污染的機(jī)會(huì)，用于保護(hù)操作人員，保護(hù)實(shí)驗(yàn)室環(huán)境，保護(hù)實(shí)驗(yàn)材料的生物**。
生物**柜的種類(lèi)及特點(diǎn)
1.Ⅱ級(jí)生物**柜
Ⅱ級(jí)生物**柜又稱為層流生物**柜。與工級(jí)生物**柜不同之處是進(jìn)入
的空氣先經(jīng)HEPA過(guò)濾，保證覆蓋臺(tái)面上的空氣是無(wú)菌的，不僅提供個(gè)人防護(hù)，也保護(hù)樣品不受污染。Ⅱ級(jí)生物**柜共分Ⅱ級(jí)A和Ⅱ級(jí)B型2種，又可進(jìn)一步再分為Ⅱ級(jí)A ?、Ⅱ級(jí)A ?Ⅱ級(jí)B ?、Ⅱ級(jí)B?型。Ⅱ級(jí)生物**是自遏型的。流動(dòng)空氣中的70％可以反復(fù)循環(huán)再利用。此種生物**柜適合于細(xì)胞或組織培養(yǎng)、接觸2～3級(jí)危險(xiǎn)等級(jí)病原體的操作，如果穿正壓防護(hù)服可在Ⅱ級(jí)生物**柜上從事接觸4級(jí)危險(xiǎn)等級(jí)感染因子的操作。
(1)Ⅱ級(jí)A型生物**柜
Ⅱ級(jí)A型生物**柜(圖1)有1個(gè)內(nèi)置風(fēng)機(jī)將實(shí)驗(yàn)室空氣以0．38 m／s
的速率吸入**柜，通過(guò)HEPA濾器后向下，在距工作臺(tái)表面6．18 cm處分開(kāi)，一半通過(guò)前面的排風(fēng)格柵，另一半通過(guò)后面的排風(fēng)格柵。所有實(shí)驗(yàn)中產(chǎn)生的氣溶膠或液滴均被向下氣流帶走。氣流經(jīng)排出通道到達(dá)**柜頂部的2個(gè)HEPA濾器之間，此時(shí)，約70％的氣體經(jīng)供風(fēng)HEPA過(guò)濾器重新返回柜內(nèi)操作區(qū)域被再利用，其余30％的氣體經(jīng)排風(fēng)過(guò)濾器后被排到實(shí)驗(yàn)室再反復(fù)利用，或通過(guò)建筑物的排風(fēng)系統(tǒng)排到外界。
3.生物**柜的通風(fēng)連接
Ⅱ級(jí)A1型和A2型外排式生物**柜有“套管式”或“傘形排氣罩式”的連接。套管安裝在**柜的排風(fēng)管上，將**柜內(nèi)排出的氣體，引入建筑物的排氣系統(tǒng)。在套管與**柜排風(fēng)管之間留有1個(gè)直徑差為2．5 cm的開(kāi)口，以便讓實(shí)驗(yàn)室內(nèi)的空氣一起抽人建筑物的排風(fēng)系統(tǒng)中。建筑物的排風(fēng)能力必須能滿足房間和柜中排風(fēng)的要求。套管必須是可拆卸的或設(shè)計(jì)成可對(duì)生物**柜進(jìn)行操作測(cè)試類(lèi)型。通常，建筑物氣流的波動(dòng)對(duì)套管式連接的生物**柜的功能不會(huì)有太大的影響。
Ⅱ級(jí)B1和B2型生物**柜通過(guò)硬管，亦即沒(méi)有任何開(kāi)口地、牢固地連接到建筑物的排風(fēng)系統(tǒng)，或者好是連接到專(zhuān)門(mén)的排風(fēng)系統(tǒng)。建筑物排風(fēng)系統(tǒng)的排風(fēng)量和靜壓必須與生產(chǎn)商所指定的要求正好一致。對(duì)硬管道連接的生物**柜進(jìn)行認(rèn)證時(shí)，要比將空氣再循環(huán)送回房間或采用套管連接的生物**柜更費(fèi)時(shí)。
4.生物**柜的選擇
購(gòu)買(mǎi)生物**柜時(shí)應(yīng)考慮所提供的生物防護(hù)作用是針對(duì)操作人員個(gè)人的還是針對(duì)實(shí)驗(yàn)樣品的；若是針對(duì)操作人員的防護(hù)應(yīng)明確是針對(duì)病原微生物的還是針對(duì)有毒化學(xué)物質(zhì)或兩者兼而有之。若是針對(duì)病原微生物的還應(yīng)強(qiáng)調(diào)微生物的生物危害級(jí)別；若是針對(duì)有毒化學(xué)物質(zhì)的可按照以下原則作選擇：工級(jí)或Ⅱ級(jí)A型生物**柜中不進(jìn)行揮發(fā)性或毒性化學(xué)物質(zhì)操作。Ⅱ級(jí)B1型生物**柜只可用于少量的揮發(fā)性或毒性化學(xué)物質(zhì)的操作，如要進(jìn)行一定量的揮發(fā)性或毒性化學(xué)物質(zhì)的操作必須使用Ⅱ級(jí)B2型生物**柜。不同型別的生物**柜排氣特點(diǎn)不同，見(jiàn)表1。
生物**柜的正確使用和安放
1．安放
進(jìn)入生物**柜的空氣速率約是0．45 m／s，按照這種速率，氣流的完整性很容易受附近人員的走動(dòng)、窗戶的開(kāi)關(guān)、門(mén)的開(kāi)啟和關(guān)閉、空調(diào)運(yùn)行等因素的影響。為避免上述因素的干擾，生物**柜應(yīng)放在遠(yuǎn)離人員活動(dòng)、物品流動(dòng)以及可能會(huì)擾亂氣流的地方。為了方便起見(jiàn)，應(yīng)在**柜的后面、左右兩側(cè)面各留30 cm的空間，以利于**柜的維護(hù)。上端應(yīng)留30～35 cnl空間，以便準(zhǔn)確測(cè)量空氣通過(guò)排風(fēng)過(guò)濾器的速度及排風(fēng)過(guò)濾器的更換。
2．操作人員
使用生物**柜時(shí)，操作人員手臂的伸入或取出時(shí)應(yīng)緩慢，垂直于前端開(kāi)口處，從而保證**柜前端氣流的完整性。應(yīng)在手或胳膊伸入柜中1 min后開(kāi)始操作，以便**柜對(duì)手或胳膊表面的空氣進(jìn)行凈化處理。實(shí)驗(yàn)所需器材應(yīng)一次性放人生物**柜，盡量減少或限制操作人員手在**柜中的進(jìn)出次數(shù)。
3．實(shí)驗(yàn)材料的放置
Ⅱ級(jí)生物**柜前端開(kāi)口處嚴(yán)禁被紙張、設(shè)備或其他物品覆蓋。物品放人生物**柜后，表面要用70％的乙醇擦拭。柜內(nèi)應(yīng)備有1塊浸過(guò)**劑的毛巾，以便蘸吸濺出的液體。實(shí)驗(yàn)材料盡量放在柜的后面，笨重的物品放在一邊，產(chǎn)生氣溶膠的物品也應(yīng)放在柜的后面。實(shí)驗(yàn)器材應(yīng)按順序從清潔的排放到污染的。污染的實(shí)驗(yàn)材料不。應(yīng)隨時(shí)拿出柜外，操作者的手也不應(yīng)頻繁地進(jìn)出**柜。
4．操作和維持
大多數(shù)的生物**柜設(shè)計(jì)成**24 h開(kāi)機(jī)，調(diào)查發(fā)現(xiàn)連續(xù)開(kāi)機(jī)有利于控制實(shí)驗(yàn)室灰塵和粒子。Ⅱ級(jí)A型不用時(shí)可以關(guān)閉。Ⅱ級(jí)B型在使用時(shí)要保持實(shí)驗(yàn)室空氣平衡，因此**中若有數(shù)個(gè)操作過(guò)程，其間不應(yīng)中斷運(yùn)行。實(shí)驗(yàn)開(kāi)始前5 rain就應(yīng)啟動(dòng)生物**柜，凈化局部空氣。使用中若出現(xiàn)任何故障均應(yīng)及時(shí)向上級(jí)人員報(bào)告并請(qǐng)專(zhuān)職技術(shù)人員維修。
5．紫外線
生物**柜中不需要紫外燈。假女盯要用，每周應(yīng)對(duì)燈管作清潔，除去塵埃，保證**效果。應(yīng)定期監(jiān)測(cè)紫外燈的輻射強(qiáng)度。要防止紫外線對(duì)眼睛或皮膚的灼傷。
6．明火
生物**柜內(nèi)近似無(wú)菌的環(huán)境中應(yīng)避免使用明火，一方面它可干擾氣流運(yùn)行，其次，若操作中使用揮發(fā)性或易燃物質(zhì)時(shí)會(huì)造成危險(xiǎn)。操作時(shí)需用接種環(huán)的，盡可能地用一次性的塑料接種環(huán)，使用金屬接種環(huán)的應(yīng)該用微型燃燒器或電爐**而不應(yīng)該使用明火。
7．溢出
在實(shí)驗(yàn)室工作的每一個(gè)人都應(yīng)熟知含微生物的樣品溢出時(shí)的處理程序。一旦生物**柜中發(fā)生有生物危害的物品溢出時(shí)，應(yīng)在**柜處于工作狀態(tài)下立即進(jìn)行清理。要使用有效的**劑，并在處理過(guò)程中盡可能減少氣溶膠生成。實(shí)驗(yàn)完畢后，柜中所有接觸病原體的材料均應(yīng)作****處理。
8．清潔和**
工作完畢后，柜中所有的物品都應(yīng)**表面污染并移出柜外，柜內(nèi)工作臺(tái)表面和柜的內(nèi)壁應(yīng)用含氯石灰(漂白粉)或70％乙醇**。若用腐蝕性的化學(xué)劑**后還應(yīng)用**水再擦洗。關(guān)機(jī)前應(yīng)運(yùn)行5 min，以便對(duì)殘留氣體進(jìn)行凈化。
9．**污染
濾膜更換之前生物**柜要由專(zhuān)業(yè)人員用甲醛熏蒸**。
10．個(gè)人防護(hù)設(shè)施
使用生物**柜的操作人員應(yīng)穿工作服。在生物**1～2級(jí)實(shí)驗(yàn)室中工作的人員可穿普通的工作服；在3～4級(jí)實(shí)驗(yàn)室工作的人穿反背式實(shí)驗(yàn)隔離衣具有更好的保護(hù)效果。手套應(yīng)能包住腕關(guān)節(jié)上的防護(hù)服。有些操作可能要戴口罩和眼罩。
11．警報(bào)
生物**柜有發(fā)出1種或2種警報(bào)的功能。一當(dāng)窗框移動(dòng)時(shí)，警報(bào)會(huì)響，表明操作者將窗框移到一個(gè)不合適的地方去了，糾正以后警報(bào)解除。氣流警報(bào)表明柜中正常氣流運(yùn)行模式中斷，對(duì)操作者的保護(hù)作用和對(duì)樣品防污染的作用減至低，存在危險(xiǎn)。警報(bào)響時(shí)，應(yīng)立即停止工作并迅速報(bào)告上級(jí)人員。作為制造商，在產(chǎn)品的使用說(shuō)明書(shū)的操作部分應(yīng)詳細(xì)論述這一內(nèi)容，對(duì)有關(guān)人員使用生物**柜的培訓(xùn)材料中也應(yīng)有此內(nèi)容。
12．生物**柜的認(rèn)證
每臺(tái)生物**柜功能的完整性和操作的有效性能都應(yīng)作檢定。安裝時(shí)應(yīng)按國(guó)家或國(guó)際標(biāo)準(zhǔn)檢定，以后應(yīng)根據(jù)制造商說(shuō)明書(shū)定期由專(zhuān)職技術(shù)人員檢定。對(duì)生物**柜使用有效性的評(píng)價(jià)應(yīng)包括以下內(nèi)容：功能完整性實(shí)驗(yàn)，HEPA濾器密封性試驗(yàn)，對(duì)向下氣流速度、正面氣流速度、負(fù)壓／換氣次數(shù)、氣流的煙幕模式，以及警報(bào)和互鎖系統(tǒng)進(jìn)行測(cè)試。還可選擇漏電、光照度、紫外光輻射強(qiáng)度，噪音級(jí)別，振動(dòng)性等試驗(yàn)。檢測(cè)人員要經(jīng)過(guò)專(zhuān)門(mén)的培訓(xùn)，采用專(zhuān)門(mén)的技術(shù)和儀器設(shè)備。建議由有資質(zhì)的專(zhuān)業(yè)人員來(lái)進(jìn)行測(cè)試。
對(duì)醫(yī)學(xué)實(shí)驗(yàn)室的管理人員而言，正確選擇生物**柜的類(lèi)型，合理安放，正確使用，每年認(rèn)證是一·個(gè)復(fù)雜但又必要的過(guò)程。這些活動(dòng)應(yīng)在有經(jīng)驗(yàn)并訓(xùn)練有素的專(zhuān)家的指導(dǎo)下進(jìn)行。這些專(zhuān)家應(yīng)熟悉相關(guān)文獻(xiàn)，受過(guò)與生物**柜有關(guān)方面的培訓(xùn)。作為操作人員則應(yīng)在使用前接受操作、保養(yǎng)、維護(hù)的正規(guī)培訓(xùn)。
